自噬在电针改善小鼠脓毒症相关性脑病中的作用

目的:评价自噬在电针改善小鼠脓毒症相关性脑病(SAE)中的作用。方法:健康雄性C57BL/6小鼠135只，8~12周龄，体质量22~25 g，随机选取10只小鼠麻醉后取盲肠内容物制备盲肠浆液；其余125只小鼠采用随机数字表法分为5组( n＝25)：假手术组(Sham组)、SAE组、SAE+电针组(SAE+EA组)、SAE+电针+自噬激动剂雷帕霉素组(SAE+EA+R组)和SAE+电针+自噬抑制剂3-甲基腺苷组(SAE+EA+MA组)。腹腔注射小鼠盲肠内容物浆液200 μl建立脓毒症模型。SAE+EA组、SAE+EA+R组和SAE+EA+MA组分别于造模后2、24、48和72 h时在双侧足三里穴行电针刺激，SAE+EA+R组和SAE+EA+MA组于电针刺激前30 min时分别腹腔注射雷帕霉素10 mg/kg和3-甲基腺苷15 mg/kg。记录小鼠造模后7 d的生存情况。于造模后8~12 d时每组取10只小鼠进行Morris水迷宫实验检测学习记忆能力；于造模后12 d时每组取5只小鼠麻醉处死后取海马组织，采用ELISA法检测IL-1β、IL-18及TNF-α含量，采用Western blot法检测p62、自噬相关16样蛋白1(ATG16L1)和NOD样受体蛋白3(NLRP3)的表达水平。 结果:与Sham组比较，其余4组造模后7 d生存率降低( P<0.01)；与SAE组、SAE+EA组、SAE+EA+R组和SAE+EA+MA组造模后7 d生存率差异无统计学意义( P>0.05)。与Sham组比较，SAE组目标象限活动时间缩短，逃避潜伏期延长，穿越原平台位置次数减少，海马组织TNF-α、IL-1β及IL-18含量升高，ATG16L1表达下调，p62及NLRP3表达上调( P<0.05)。与SAE组比较，SAE+EA组逃避潜伏期缩短，目标象限活动时间延长，穿越原平台位置次数增多，海马组织TNF-α、IL-1β及IL-18含量降低，ATG16L1表达上调，p62及NLRP3表达下调( P<0.05)。与SAE+EA组比较，SAE+EA+R组水迷宫实验各指标差异无统计学意义( P>0.05)，海马组织TNF-α、IL-1β及IL-18含量降低，ATG16L1表达上调，p62及NLRP3表达下调，SAE+EA+MA组逃避潜伏期延长，目标象限活动时间缩短，穿越平台次数减少，海马组织TNF-α、IL-1β及IL-18含量升高，ATG16L1表达下调，p62及NLRP3表达上调( P<0.05)。 结论:电针改善小鼠SAE的机制与促进海马神经元自噬，抑制NLRP3炎症小体激活，减轻神经炎症反应有关。