"大黄-桃仁"药对调控子宫腺肌病小鼠子宫内膜细胞动力学特征的机制研究

目的 探索活血化瘀药对"大黄-桃仁"(Rhubarb-Peach kernel,RP)对子宫腺肌病(adenomyosis,AM)小鼠子宫内膜细胞的动力学特征的调控作用.方法 体外培养hEM-15A细胞,MTT实验及Transwell实验检测RP处理后细胞活力、增殖及迁移能力变化.采用同种异体垂体移植建立AM小鼠模型,随机分为空白对照组、模型组及药物治疗组,采用热板痛及机械痛觉过敏实验检测治疗疗效、HE染色观察病理浸润程度.透射电镜观察细胞动力学特征变化,免疫荧光染色检测微丝蛋白骨架调节酶 Rho GTP 酶成员 A(ras homolog gene family,member A,RhoA)、Rho 激酶(rhokinase 1,Rock1)、Ras 相关的 C3 肉毒素底物 1(ras-related C3 botulinum toxin substrate 1,Rac1)、细胞分裂周期蛋白 42(cell divi-sion cycle 42,Cdc42)的表达水平及细胞定位.结果 RP显著抑制hEM-15A细胞的异常增殖,并呈浓度依赖性;经1 mg/mL RP处理后,细胞迁移及侵袭能力显著下降.动物实验表明,与模型组比较,经RP治疗后小鼠热板痛及机械痛反应时间显著缩短,病理浸润程度减轻.电镜结果表明,与空白组比较,模型组小鼠子宫内膜上皮细胞排列紊乱、体积缩小,细胞形态由柱状变为梭形或不规则形;细胞间紧密连接、桥粒连接及细胞周边指状突起减少,细胞膜局部形成皱褶,经RP治疗后上述动力学特征变化改善.免疫荧光染色结果显示,RhoA、Rock1、Rac1、Cdc42可定位表达于子宫内膜腺上皮细胞、间质细胞及平滑肌细胞.与对照组比较,模型组小鼠RhoGTP酶的表达显著上调,经RP治疗后回调.结论 AM子宫内膜上皮细胞动力学特征发生改变,有助于其从静止态向迁移状态转化.RP对AM的治疗机制与RhoGTP酶调控AM动力学特征,从而抑制细胞异常运动能力有关.