环状RNA_BANP调控微小RNA-496对前列腺癌细胞生物学行为的影响

目的 探讨环状RNA(circRNA)_BANP对前列腺癌细胞生物学行为的影响及其可能作用机制.方法 采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测circ_BANP、miR-496的表达量;体外培养人前列腺癌细胞DU145,并敲低细胞中circ_BANP或miR-496的表达;双荧光素酶报告实验检测circ_BANP与miR-496的靶向关系;功能实验分析细胞表型变化;蛋白质印迹法(Western blot)检测蛋白表达量;计量资料以均数±标准差((x)±s)表示,比较采用独立样本t检验,以及单因素方差分析.结果 circ_BANP和miR-496在癌旁组织中的表达量分别是0.96±0.19和1.02±0.17,在前列腺癌组织中的表达分别是3.10±0.39和0.50±0.13,且差异有统计学意义(t=35.228、17.352,P＜0.05).Circ_BANP 和 miR-496 在 si-NC 组中的表达分别是 1.00±0.00 以及1.00±0.00,在si-circ_BANP组中的表达分别是0.26±0.03和3.41±0.10,且差异有统计学意义(t=74.000、72.300,P＜0.05).circ_BANP 能够负向调控 miR-496 的表达.相对于 si-NC 组和miR-NC组,si-circ_BANP组和miR-496组中克隆形成数减少,细胞增殖抑制率升高;相对于si-circ_BANP+抗miR-NC组,si-circ_BANP+抗miR-496组中克隆形成数增加,细胞增殖抑制率降低;且差异有统计学意义(F=268.325、1535.056,P＜0.05).当分别与si-NC组和miR-NC组比较时,si-circ_BANP组和miR-496组中细胞凋亡率和B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(bax)蛋白水平升高,B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)蛋白水平降低;与si-circ_BANP+抗miR-NC组比较,细胞凋亡率、bax和bcl-2表达在si-circ_BANP+抗miR-496组中有相反趋势;且差异有统计学意义(F=420.149、397.476、255.709,P＜0.05).当分别与 si-NC 组和 miR-NC 组比较时,si-circ_BANP 组和miR-496组中划痕愈合率降低,迁移细胞数减少;与si-circ_BANP+抗miR-NC组比较,划痕愈合率和迁移细胞数在si-circ_BANP+抗miR-496组中有相反趋势;且差异有统计学意义(F=322.543、490.268,P＜0.05).结论 沉默circ_BANP可通过靶向调控miR-496表达而减弱前列腺癌细胞增殖、克隆形成、迁移能力及诱导细胞凋亡.