间充质干细胞对自然衰老脓毒症大鼠炎性因子及T淋巴细胞亚群的影响

目的 探讨间充质干细胞(MSCs)对自然衰老脓毒症大鼠炎性因子及T淋巴细胞亚群的影响.方法 将90只自然衰老的SD大鼠(21月龄)按随机数字表法分为3组,其中模型组36只,治疗组36只,假手术组18只,各组大鼠再随机平均分为3组,分别在造模或治疗后6、24和72 h麻醉断头处死取材.采用盲肠结扎穿孔法(CLP)建立脓毒症模型.假手术组除不行盲肠结扎穿孔法外,其他操作同模型组.治疗组大鼠在造模1 h后,经尾静脉注射脐带MSCs,模型组和假手术组在造模1 h后经尾静脉注射等量的生理盐水.观察各组大鼠72 h生存率,通过Aimplex法检测白细胞介素(IL)-1β、IL-6、IL-10、IL-17A、肿瘤坏死因子(TNF)-α及转化生长因子(TGF)-β的水平.对各组大鼠脾组织行TUNEL染色,激光共聚焦显微镜观察脾淋巴细胞凋亡情况;流式细胞术分析各组大鼠CD4+/CD8+T细胞比值.结果 假手术组大鼠观察期内无异常,术后72 h存活率为100.00％.模型组大鼠术后出现竖毛、食欲不振及精神萎靡等症状,而这些症状在治疗组大鼠中有所缓解,且治疗组CLP术后72 h存活率明显高于模型组(66.67％vs.41.67％,P<0.01).与假手术组相比,模型组IL-1β、IL-6和IL-17A等促炎因子水平升高,脾结构模糊、淋巴细胞凋亡比例增加,外周血和脾中CD4+/CD8+T淋巴细胞比值降低,差异均有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,治疗组IL-1β、IL-6和IL-17A等促炎因子水平降低,抗炎因子IL-10水平升高,脾结构清晰、淋巴细胞凋亡明显减少,外周血和脾中CD4+/CD8+T淋巴细胞比值升高,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 MSCs能够明显提高自然衰老脓毒症大鼠的生存率,抑制过度的炎症反应,减少淋巴细胞凋亡,改善机体免疫功能,从而发挥保护作用.