连花清瘟药渣及发酵产物的生物活性研究

旨在研究连花清瘟药渣和发酵产物的生物学活性,探明自然发酵、优化发酵1(4MYL)和优化发酵2(Y4ML)三种发酵方式对药渣中营养成分的改变以及乙醇提取物和水提取物抑菌效果及抗病毒效果的差异.采用肉汤稀释法测定药渣发酵前后不同提取物对猪副嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,HPS)、猪链球菌二型(Strepto-coccus suis type 2,SS2)、肠毒性大肠杆菌(Enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)3种致病菌菌株的最小抑菌浓度(MIC);以伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)、猪圆环病毒 2 型(porcine circovirus type 2,PCV2)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)分别感染非洲绿猴肾细胞(Vero)、非洲绿猴胚胎肾细胞(MARC-145)、猪肾细胞(PK-15),通过荧光显微镜观察细胞形态病变,同时结合实时荧光定量PCR技术进行病毒核酸检测和定量作为药物体外抗病毒效果的评价指标.结果表明,连花清瘟原药渣的乙醇和水提取物对HPS和SS2均表现出抑制作用,但对ETEC无抑制作用;对3种试验病毒均表现出抗病毒活性,但抗病毒活性存在一定区别.发酵后乙醇和水提取物增强了抗菌抗病毒活性,同时对ETEC表现出抑制作用.综上表明,连花清瘟药渣提取物具有不同程度的抗菌、抗病毒作用,能有效抑制猪养殖过程中HPS、SS2等常见的致病菌和病毒,发酵后能增强抗菌和抗病毒效果,具有开发成动物饲料或饲料添加剂的潜力.