Linc-ROR RNA在卵巢癌干细胞样细胞干性调控及功能维持中的作用

目的:探讨基因间长链非编码RNA-重编码调控因子(Linc-ROR RNA)在卵巢癌干细胞样细胞(OCS-LC)干性调控及功能维持中的作用及其调控机制.方法:采用无血清悬浮培养条件诱导A2780细胞生成OCS-LC,通过成球实验、分化实验以及流式分析技术分析CD133+细胞率,鉴定细胞干性特征.生物信息学分析,确定Linc-ROR RNA与miR-181 c-5 p RNA的靶向关系,双荧光素酶报告基因检测进一步验证.慢病毒转染并筛选出稳定低表达Linc-ROR RNA的细胞株,分别诱导si-ROR A2780细胞和control-ROR A2780细胞生成si-OCS-LC和control-OCS-LC,通过成球率、最大球直径和成球周期评估两组OCS-LC的成球能力.免疫荧光染色法检测两组OCS-LC中干细胞标志物CD133表达变化.RT-qPCR法检测Linc-ROR、miR-181 c-5 p以及核心转录因子Oct-4和Nanog mR-NA表达水平,Western blot法检测Oct-4和Nanog蛋白表达水平.CCK-8法、Transwell小室法检测细胞增殖、迁移和侵袭能力.结果:成功诱导OCS-LC,CD133+细胞比例和Linc-ROR mRNA表达水平显著升高.双荧光素酶报告基因检测证实Linc-ROR靶向miR-181c-5p;敲降Linc-ROR后,si-OCS-LC组miR-181c-5p表达显著升高,Oct-4、Nanog表达显著降低,CD133+细胞率、成球、增殖、迁移侵袭能力显著降低.结论:Linc-ROR可能通过调控miR-181 c-5 p的异常表达,促进核心转录因子Oct-4和Nanog表达,参与OCS-LC干性获得及功能维持,可能在卵巢癌转移中发挥重要作用.