巴豆霜对局灶性脑缺血再灌注大鼠海马区ERK5通路的影响

目的:观察巴豆霜对大鼠脑缺血再灌注模型ERK5蛋白水平的影响,以期探讨巴豆霜对缺血性脑血管疾病的保护机制.方法:将192只SPF级SD雄性大鼠随机分为假手术组(A组)、巴豆霜高剂量组(B组)、巴豆霜中剂量组(C组)、巴豆霜低剂量组(D组)、尼莫地平组(E组)和模型组(F组),每组36只.除假手术组外,其余5组参照改良的Longa法用线栓阻塞大鼠右侧大脑中动脉制备局灶性脑缺血模型,根据取材时间点的不同分为1d、3d、7d组.所有SD大鼠取材前需参照Garcia JH法进行神经功能评分.所有SD大鼠均采取同一时间点灌胃,每天两次.应用HE染色法,用光学显微镜观察SD大鼠不同时间点CA1区脑组织病理学形态的变化;应用RT-PCR法、Western Blot检测观察MAPK-ERK通路中ERK5的表达情况.结果:与假手术组相比,各组神经功能评分评分均下降、ERK5的磷酸化水平均升高、ERK5的mRNA相对表达明显升高(P＜0.01);与模型组相比,各药物组神经功能评分均增加、ERK5的磷酸化水平均下降,ERK5mRNA相对表达均下降(P＜0.01);各药物治疗组中,巴豆霜高剂量组神经功能评分优于其它组,ERK5的磷酸化水平及ERK5的mRNA相对表达较其它组均降低,且逐渐接近假手术组;观察各组大鼠神经元的形态结构.结果表明,模型组SD大鼠与假手术组相比,模型组大鼠海马CA1区神经细胞出现不同程度核固缩、核体不规则、细胞间隙增大、间质水肿、核与质排列不清;与模型组相比,各药物治疗组能不同程度改善核固缩程度、减少细胞及间质的水肿,使胞膜清晰,形态改善;各药物治疗组中,以巴豆霜高剂量组对细胞形态的改善程度最为明显.结论:巴豆霜可改善大鼠脑缺血再灌注后的神经功能损伤,发挥促进神经元细胞增殖分化,这可能与其参与调节MAPK-ERK通路中ERK5的表达相关.