尿酸调控核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3炎症小体活化促进肾小管上皮-间充质转化

目的 探讨尿酸对人肾小管上皮-间充质转化的影响及其机制.方法 体外培养人肾皮质近曲小管上皮细胞(HK-2细胞),以不同浓度尿酸作用不同时间,观察HK-2细胞外形改变;利用蛋白免疫印迹检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、半胱天冬酶-1(Caspase-1)等分子的表达,酶联免疫吸附试验法检测白细胞介素-1β(IL-1β)的表达.选择尿酸作用的最佳浓度和时间,加入NLRP3抑制剂MCC950下调NLRP3的表达,检测其对于上述蛋白表达的影响.结果 随着尿酸浓度的增加,HK-2形态由立方形转变为长条形.α-SMA、NLRP3、ASC、Caspase-1等蛋白表达随着尿酸浓度和作用时间的增加而增加(P＜0.05);E-cadherin表达随着尿酸浓度和作用时间的增加而下降(P＜0.05);IL-1β的分泌随着尿酸浓度的增加而增加[0、0.1、0.2、0.4和0.8 mmol/L:(9.56±1.47)比(12.28±2.32)比(14.89±1.23)比(21.41±2.55)比(26.60±3.97)ng/L,F=38.56,P＜0.05],随着尿酸作用时间的增加而增加[0、12、24、48 和 72 h:(8.90±2.14)比(10.97±1.12)比(15.27±1.63)比(22.43±3.91)比(31.09±3.34)ng/L,F=59.13,P＜0.05].与单纯尿酸干预相比,尿酸+MCC950干预的α-SMA、NLRP3、ASC、Caspase-1等蛋白表达下降(P＜0.05),IL-1β的分泌减少[(21.67±2.71)比(28.96±3.05)ng/L,t=3.99,P＜0.01],E-cadherin表达增加(P＜0.05).结论 尿酸可导致肾小管上皮-间充质转化,其机制可能是通过激活NLRP3炎症小体实现的.