不同稀释法对公猪冷冻精液品质的影响

公猪精子对温度变化十分敏感,在冷冻保存过程中极易受到冷冻损伤,虽然Polge等[1]在1956年首次运用冻精技术进行人工授精(AI)并获得仔猪,但是到目前为止世界范围内猪冷冻精液应用比例仍没超过1％.冷冻保护液是影响冻精冷冻效果的主要因素之一,目前常用以卵黄为基础的稀释液添加冷冻保护剂来进行冻精研究.常用的冷冻保护剂有甘油、DMSO(二甲基亚砜)、乙二醇等,这些渗透性冷冻保护剂虽然具有优异的抗冻作用,但均具有细胞毒性,所以多数会在冷冻前进行添加,以降低不良影响.一步稀释法和两步稀释法进行精液冷冻主要是针对冷冻保护剂的细胞毒性衍生出来的冷冻方法,虽然现在以两步稀释法冷冻公猪精液在实验室层面得到满意且稳定的冷冻效果,但两步稀释法在实际生产中会增加处理时间.为提高生产效率,进行一步稀释冷冻试验,探索一步稀释法冷冻猪精技术.据相关报道,不同稀释方法的冻精研究已在绒山羊[2]、牛[3]、犬[4]等动物上得到应用,但冷冻效果参差不齐.为了提高精子的冻融质量,OEP (Orvus ES Paste)、ESP(Equex STM Paste)作为新型冷冻保护剂已被应用到冻精研究中.OEP、ESP是一类表面活性剂,对精子膜结构有保护修补作用,主要含有十二烷基硫酸钠(SDS)复合物,能够提高冻融精子活率、活力及质膜完整率[5].精液在超低温下可以长期有效的保存,这对于保护种猪种质资源及基因传递具有突出的优势.