草地贪夜蛾V-ATPase亚基E、F、G和H基因的克隆与表达分析

[目的]液泡型ATP酶(vacuolar-type proton ATPase,V-ATP酶)维持着适合真核细胞内膜室生化功能的pH环境.本研究旨在克隆草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda V-ATP酶V1结构域E、F、G和H亚基基因,并对其时空表达谱进行分析.[方法]采用RT-PCR技术克隆了草地贪夜蛾V-ATP酶E、F、G和H亚基基因,通过实时荧光定量PCR技术测定了其在草地贪夜蛾不同发育阶段的表达动态.[结果]V1结构域E、F、G和H亚基在鳞翅目昆虫之间具有高度保守性,且均与斜纹夜蛾Spodoptera litura同源性最高.E～H亚基在草地贪夜蛾所有发育时期均有表达,且都出现了在卵期和蛹期表达量低,雄成虫中高量表达的现象,同时不同的亚基在不同发育阶段表达量又有差异.[结论]本研究克隆了草地贪夜蛾V-ATP酶E、F、G和H亚基基因,明确了其在不同发育阶段的表达水平,为进一步研究基因功能以及筛选分子靶标奠定了基础.