方剂反证在构建病证结合动物模型中的作用——以逍遥散反证抑郁症肝郁脾虚证为例

目的:通过方剂反证寻找病证结合动物模型的证候稳定时间窗,并验证证候的稳定可靠性.方法:采用慢性不可预知温和应激(CUMS)法并通过体质量测量、糖水消耗实验、行为学实验、脑组织5-羟色胺(5-HT)检测建立大鼠抑郁症模型,通过人类临床症状等效转化为大鼠宏观表征等方法来进行大鼠的肝郁脾虚证的证候判别,基于宏观表征动态采集量表用逍遥散反证抑郁症肝郁脾虚证病证结合动物模型的稳定可靠性.结果:大鼠16周龄时,CUMS组(应激8周)大鼠糖水消耗量、旷场实验穿格次数和活动总距离均明显低于正常组(P＜0.05);免疫组化结果显示,CUMS组大鼠脑组织海马CA2区5-HT含量也明显低于正常组(P＜0.05),说明抑郁症疾病的模型制作成功.CUMS组大鼠肝郁脾虚证出现于14周龄(应激后6周),16周龄(应激后8周)时数量达到最大值占比约70％,往后数量逐渐下降.方剂反证CUMS组14,16,18,20,22周龄大鼠证候积分分别减少66.6％,70.7％,54.8％,50.4％,44.8％,证候疗效分别为有效、显效、有效、有效、有效.结论:CUMS组大鼠14～16周龄即CUMS 6～8周是抑郁症肝郁脾虚证稳定可靠的时间窗.