Analyse phénotypique d’une souris knock-in exprimant un variant gain de fonction du hLHCGR obtenue par une approche CRISPR-CAS9

Contexte Les mutations gain de fonction du recepteur LH (hLHCGR) provoquent une testotoxicose chez les garcons sans phenotype decrit a ce jour chez les femmes. Chez une patiente presentant une hyperandrogenie et une anovulation severes, nous avons decouvert (Whole Exome) un variant tres rare du hLHCGR a l’etat heterozygote avec activite constitutive. L’objectif de ce travail est d’etablir une relation causale entre ce variant et le phenotype de la patiente. Methodes nous avons genere par Crispr-Cas9 un modele de souris Knock-in (Ki) portant l’homologue de cette mutation activatrice du hLHCGR. Le phenotype des femelles a ete analyse : âge pubertaire (ouverture vaginale et cycles oestriens), statut hormonal (LCMS), histologie des ovaires, performance reproductive. Resultats Des souris femelles portant la mutation a l’etat homo et heterozygote (KiLhcgr± et -/-) ont ete obtenues. Les souris KiLhcgr-/- avaient des cycles oestriens irreguliers. Le nombre cumule de petits dans le groupe de souris KiLhcgr-/- etait diminue, consequence du faible nombre de portees par femelles KiLhcgr-/-. Discussion Un phenotype discret est observe chez la souris KiLhcgr-/- et l’analyse histologique des ovaires sera necessaire pour evaluer l’impact de cette mutation. Nous avons observe in vitro que l’activite constitutive du Lhcgr mute murin etait plus faible que celle du recepteur humain. L’humanisation de la region du recepteur murin portant la mutation est en cours pour etayer son retentissement sur l’activite de ce recepteur.