广东虫草邻氨基苯甲酸合酶基因克隆及不同实验条件下的表达

[背景]邻氨基苯甲酸合酶(TrpE)广泛存在于植物和微生物中,参与色氨酸和生长素的生物合成,在生长发育及胁迫响应过程中具有重要的作用.广东虫草(Tolypocladium guangdongense)是华南地区特有的一种极具开发价值的虫草资源.[目的]明确rgtrpE基因特征,并探究该基因在不同发育时期和不同温度下的表达模式.[方法]从广东虫草中克隆 TgtrpE编码区序列,并进行生物信息分析和系统发育分析,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)分析TgtrpE在广东 虫草中不同发育时期及温度胁迫下的表达模式.[结果]TgtrpE编码区序列长度为1 613 bp(DNA)和1 563 bp(cDNA),编码521个氨基酸,预测其蛋白分子量约为56.86 kD.系统发育分析显示,TgTrpE蛋白与子囊菌中的TrpE蛋白聚为一个分支,与奇异弯颈霉(Tolyypocladium paradoxum)和头状弯颈霉(Tolypocladium capitatum)具有较高的相似性.RT-qPCR结果表明:在广东虫草原基和幼嫩子实体的发育过程中,TgtrpE显著上调,而在成熟子实体期该基因显著下调;在温度胁迫过程中,TgtrpE 显著下调表达.[结论]TgtrpE可能在广东虫草原基形成、子实体发育及温度胁迫响应过程中具有重要调控作用.