西藏大花红景天RcUDPGTs基因克隆与表达分析

以西藏大花红景天为研究材料,利用生物信息学和实时荧光定量PCR技术对RcUDPGTs基因家族中18个成员的序列和表达模式进行分析,并构建RcUDPGT(JX228125.1)的诱饵载体以筛选拟南芥酵母文库中互作蛋白.结果表明,RcUDPGTs基因核苷酸序列长度为1 400 bp左右,编码452～498个氨基酸.一级结构中N端序列保守性较低,C端的保守性较高,均含有尿苷二磷酸葡萄糖结合结构域(PSPG盒).蛋白质三级结构均呈现一定相似性,具有UDP糖供体识别中心,且含有多个可磷酸化位点.qRT-PCR结果显示RcUDPGTs基因在根、茎、叶三个器官中均有表达,且其表达量能够受到低温/紫外和多种植物激素(脱落酸、生长素、茉莉酸甲酯)的调控,但表达模式差异较大.与阴性对照相比,RcUDPGT基因没有自激活活性和细胞毒性,并筛选到两个互作明显的拟南芥基因AtKCR1(AT1G67730.1)与AtSNL4(AT1G70060).以上结果丰富了RcUDPGTs基因的研究成果,为了解大花红景天与高原环境的适应性机制,同时为深入研究根部次生代谢产物的合成和积累提供一定理论基础.