iTRAQ法分析孕期慢性应激子鼠脑海马组织中蛋白质组学变化

目的 分析孕期慢性应激子鼠脑海马组织中差异表达的蛋白质及富集的信号通路,从整体水平上探讨可能的作用机制.方法 通过慢性不可预知温和应激(CUMS)建立母鼠孕期慢性应激模型,模型组母鼠每天给予刺激,连续21 d;对照组母鼠正常环境饲养.应激前1天、第1、7、14、21天分别进行内眦静脉取血,测定母鼠血浆皮质酮含量.子鼠分为对照子鼠组和模型子鼠组,采用同位素标记的iTRAQ技术对子鼠海马组织的差异蛋白进行分析和鉴定,GO功能注释和KEGG富集分析差异蛋白参与的信号通路,String数据库分析差异蛋白间的相互作用.结果 模型组母鼠血浆皮质酮含量高于同期对照组(P均<0.05),说明模型组大鼠处于慢性应激状态.两子鼠组共筛选和鉴定出5065个蛋白,差异蛋白有26个(P<0.05),上调蛋白19个(FC>1.2),下调蛋白7个(FC<0.83).GO功能注释表明差异蛋白主要参与23种生物过程、14种细胞组分和9种分子功能.KEGG富集分析共鉴定到57条通路,其中显著富集的信号通路有8条(P<0.05),主要包括神经活性配体-受体相互作用、cGMP-PKG信号通路、胰腺分泌等.差异蛋白功能互作网络分析发现:酪氨酸蛋白激酶受体(INSR)、丝氨酸蛋白酶1(PRSS1)、cGMP依赖性蛋白激酶(PKG)、胆囊收缩素(CCK)关系最为密切.结论 孕期慢性应激对子鼠脑海马发育的影响以神经活性配体-受体相互作用、cGMP-PKG信号通路及胰腺分泌为主的多种信号通路共同作用,与INSR、PRSS1、PKG、CCK等蛋白的差异表达密切相关.