表皮葡萄球菌胞间黏附素基因操纵子对细菌与真菌混合生物膜相关炎症作用影响的体内研究

目的 探讨表皮葡萄球菌胞间黏附素基因(intercellular adhesion,ica)操纵子对气管导管材料表面表皮葡萄球菌与白假丝酵母菌混合生物膜相关炎症作用影响的体内研究.方法 取表皮葡萄球菌标准株RP62A (ica操纵子阳性,阳性组)、ATCC12228(ica操纵子阴性,阴性组)制备浓度为1×106CFU/mL的菌液,分别与相同浓度的白假丝酵母菌标准株ATCC10231菌液按照1:1比例制备成混合培养菌液后,与气管导管材料片孵育24h,扫描电镜观察材料表面混合生物膜形成情况.取4～6月龄新西兰兔30只分为两组(n=15),分别于气管旁植入孵育24h的阳性组及阴性组气管导管材料.于术前及术后1、3、7d测量两组兔体质量.术后1、3、7d,采用ELISA检测试剂盒检测血浆中IL-1β、IL-6、TNF-α和单核细胞趋化蛋白1(monocytechemotactic protein 1,MCP-1)水平;术后7d,扫描电镜观察取出的气管导管材料片表面混合生物膜形成情况,HE染色观察材料周围组织炎症浸润情况,平板菌落计数法观察心脏、肺、肝脏、肾脏细菌感染情况.结果 扫描电镜观察示体外孵育24h后阳性组可见明显混合生物膜结构,阴性组未见混合生物膜形成.体内实验显示两组术前及术后1、3、7d体质量比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).与阴性组相比,阳性组术后1 d IL-1β及MCP-1水平,术后3、7 d IL-1β、MCP-1、IL-6、TNF-α水平均升高,组间比较差异有统计学意义(P＜0.05).扫描电镜观察示阳性组可见大量表皮葡萄球菌残留以及混合生物膜结构,阴性组见极少量表皮葡萄球菌残留,未见混合生物膜结构.HE染色示两组材料周围组织均可见炎症细胞浸润,其中阳性组中性粒细胞及淋巴细胞浸润较阴性组严重.两组心脏、肝脏细菌感染数量差异无统计学意义(P＞0.05),阳性组肺、肾脏细菌感染数量高于阴性组(P＜0.05).结论 ica操纵子在表皮葡萄球菌与白假丝酵母菌混合感染中可能由于增强了混合生物膜结构及其在体内的传播,导致炎症因子升高,细菌难以清除,感染迁延不愈.