掌叶大黄种子特性研究及无菌培养体系的构建

目的 研究掌叶大黄种子形态和发芽特性并构建无菌苗和愈伤组织培养体系,为其快繁和次生代谢调控研究提供基础.方法 从大小、净度、千粒质量、生活力、发芽率及发芽势等方面进行10批掌叶大黄种子特性分析;利用正交试验筛选大黄无菌苗建立的消毒体系及愈伤组织诱导的激素配比;HPLC法分析无菌苗和愈伤组织中10种有效成分的含量.结果10批不同产地来源掌叶大黄的果实及种子外观形态无显著差异,含水量、生活力、发芽率及发芽势有明显差异,和政县与渭源县大黄发芽特性最高;75％乙醇30 s、10％H2O215 min为大黄种子无菌苗建立的最佳消毒组合;愈伤组织诱导最佳激素为6-苄氨基腺嘌呤(1.0 mg/L)+6-糠氨基嘌呤(2.0 mg/L)+1-萘乙酸(1.5 mg/L);不同消毒剂处理种子对无菌苗10种成分的积累无显著影响(P>0.05),愈伤组织可检测出7种有效成分,含量显著低于无菌苗,大黄酚-8-O-葡萄糖苷含量较其他成分高.结论 以千粒质量、生活力、发芽率及发芽势等指标明确甘肃和政县与渭源县种子特性优良,成功建立掌叶大黄无菌苗与愈伤组织培养体系,为掌叶大黄下一步研究奠定基础.