血小板胶-胶原生物活性复合膜修复大鼠牙周骨组织缺损

背景:近些年, 组织工程学的发展为牙周组织缺损的治疗与组织再生提供了新途径.组织工程学治疗手段包括种子细胞、支架和生长因子.血小板胶因含大量血小板生长因子, 胶原常被用于支架材料的制备, 故血小板胶与胶原生物活性复合膜可为缺损组织提供支架及生长因子.目的:观察血小板胶-胶原生物活性复合膜在修复大鼠牙周骨组织缺损中的作用.方法:实验选取Wistar大鼠42只 (由上海西普尔-必凯实验动物有限公司提供) .①将胶原裁成5mm×2mm大小, 抽取6只大鼠10 mL全血后, 从大鼠新鲜全血中获取富血小板血浆, 按一定比例加入牛凝血酶、氯化钙和胶原制成血小板胶-胶原复合膜.测定全血及富血小板血浆中血小板计数值, ELISA法测定全血及富血小板血浆中血小板衍生生长因子AB、转化生长因子β、碱性成纤维细胞生长因子和血管内皮生长因子的水平. ②将剩余36只大鼠建立下颌牙周骨缺损模型 (骨缺损大小为5 mm×2 mm, 磨除牙根面牙骨质) 后, 随机分成2组.血小板胶-胶原组将血小板胶-胶原复合膜置于骨缺损处, 而对照组不放置任何材料.2, 4和8周后获取2组大鼠牙周组织标本进行苏木精-伊红染色, 测定新生牙周骨率、新生牙骨质、新生牙槽骨、新生牙周膜组织高度.免疫组织化学染色观察骨形成蛋白2的表达.结果与结论:①富血小板血浆中血小板计数均值为全血的4.78倍, 即全血制备成富血小板血浆后血小板数量显著上升 (P<0.05) .富血小板血浆中血小板衍生生长因子AB、转化生长因子β、碱性成纤维细胞生长因子和血管内皮生长因子的水平分别是全血中的3.10倍、3.45倍、7.17倍、5.45倍 (P<0.05) ; ②苏木精-伊红染色观察结果:两组新生骨率、新生牙骨质、新生牙槽骨、新生牙周膜组织高度在2周时差异无显著性意义 (P> 0.05) , 第4和第8周时, 血小板胶-胶原组上述指标均显著高于对照组 (P <0.05) ;③免疫组化结果显示, 在2周时, 血小板胶-胶原组骨形态发生蛋白2开始表达, 4周时骨形态发生蛋白2表达最强 (P <0.05) , 而8周时阳性表达减弱 (P>0.05) ;④结果提示, 血小板胶-胶原生物活性复合膜可明显促进新生牙组织再生, 并伴随着骨形态发生蛋白2的表达, 减小牙周组织缺损后的修复时间.