水蛭联合淮山药对创伤性脑损伤大鼠的干预作用

目的 探讨水蛭联合淮山药对创伤性脑损伤(TBI)大鼠的干预作用.方法 选择36只健康SD大鼠,按随机数字表法分为正常对照组、假手术组、模型组、水蛭淮山药组,每组9只.采用Feeney自由落体法复制TBI大鼠模型.制模前和制模后4?d,水蛭淮山药组给予水蛭加淮山药中药液10?mL/kg灌胃,每日2次;其余3组给予等量生理盐水.制模后24?h,采用头颅磁共振成像(MRI)观察各组大鼠脑组织的变化.制模后4?d,处死大鼠后取血,用全自动血凝仪检测各组血浆凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)水平;光镜下观察脑组织病理学改变;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组脑组织内皮素(ET)、一氧化氮(NO)和血浆D-二聚体含量;采用免疫组化法检测各组脑组织组织型纤溶酶原激活物(t-PA)、纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)、磷酸化p65(p-p65)的阳性细胞表达水平;采用流式细胞术检测各组脑组织CD61、CD62表达水平.结果 MRI和光镜下均可见模型组脑组织水肿和梗死程度均较正常对照组更明显;水蛭淮山药组脑组织水肿和梗死程度均较模型组明显减轻.与正常对照组比较,模型组ET、D-二聚体含量和t-PA、PAI-1、p-p65阳性细胞比例均显著升高〔ET(ng/L):307.6±20.7比102.6±5.5,D-二聚体(μg/L):3?193.5±622.0比882.3±231.7,t-PA:(71.4±1.1)％比(40.7±3.2)％,PAI-1(:76.9±4.7)％比(30.4±4.4)％,p-p65:(115.8±2.8)％比(57.9±2.1)％,均P<0.05〕,PT、APTT均明显延长〔PT(s):19.2±1.4比9.4±0.7,APTT(s):27.5±1.5比12.5±0.6,均P<0.05〕,NO含量明显降低(μmol/g:5.0±0.3比7.9±0.3,P<0.05).与模型组比较,水蛭淮山药组PT、APTT明显缩短〔PT(s):17.6±1.5比19.2±1.4,APTT(s):25.3±1.8比27.5±1.5,均P<0.05〕,t-PA、p-p65阳性细胞比例均显著下降〔t-PA:(57.9±4.2)％比(71.4±1.1)％,p-p65:(79.0±0.1)％比(115.8±2.8)％〕.模型组和水蛭淮山药组ET、NO、D-二聚体含量和PAI-1阳性细胞比例比较差异均无统计学意义(均P>0.05).流式细胞术分析可见:模型组大鼠脑组织中?CD61和CD62?的表达量均较假手术组上调;水蛭淮山药组大鼠脑组织中?CD61?和?CD62?的表达量均较模型组上调.结论 水蛭联合淮山药可通过缩短PT和APTT,减少t-PA、p-p65阳性细胞比例以及增加CD61、CD62,调节TBI大鼠的凝血状态和纤溶过程,改善凝血功能,进而降低进展性出血性脑损伤发生的风险,起到对TBI的保护作用.