生物钟基因Perl和细胞周期基因p53、Cyclin D1、B1、CDK在金黄地鼠口腔颊黏膜癌变不同阶段昼夜节律表达变化及与癌变发生的相关性分析

目的 探讨生物钟基因Perl和细胞周期基因p53、Cyclin D1、B1、CDK在金黄地鼠口腔颊黏膜癌变不同阶段昼夜节律表达变化及与癌变发生的相关性.方法 在黑暗和光照交替环境下饲养90只金黄地鼠,在地鼠的颊黏膜上涂抹二甲基苯并蒽(DMBA)以建立颊黏膜鳞状细胞癌模型,分别在涂抹DMBA前和涂抹DMBA6周、14周后的24小时开灯后时间(HALO)的第4个HALO开始,每隔4HALO处死5只金黄地鼠,分别获取正常颊黏膜和癌前病变以及鳞状细胞癌3个阶段各昼夜6个时间点的组织.按照常规将获取的组织进行切片,在HE染色下对组织的癌变情况进行观察;对各时间点组织中p53、CyclinD1和B1、CDK1 mRNA、Perl等表达水平采用定时定量荧光PCR(RT-PCR)进行检测.结果 Perl mRNA在鳞状细胞癌组和癌前病变组以及正常颊黏膜组中各时间点的表达均有明显差异(P<0.05);鳞状细胞癌组和癌前病变组的Perl mRNA表达中值及振幅均显著低于正常颊黏膜组(P<0.05),且鳞状细胞癌组又显著低于癌前病变组(P<0.05).细胞周期基因p53、细胞周期蛋白D1和周期蛋白依赖性激酶的mRNA在三组各时间点之间的表达差异均有统计学意义(P<0.05),而细胞周期蛋白B1的mRNA则仅在鳞状细胞癌组和正常颊黏膜组各时间点中的表达差异具有统计学意义(P<0.05).鳞状细胞癌组和癌前病变组的p53 mRNA表达中值均显著低于正常颊黏膜组(P<0.05),且鳞状细胞癌组又显著低于癌前病变组(P<0.05).鳞状细胞癌组和癌前病变组的CDK1 mRNA表达中值均显著高于正常颊黏膜组(P<0.05),鳞状细胞癌组的CyclinB1 mRNA表达中值显著高于正常颊黏膜组(P<0.05).结论 金黄地鼠实验结果提示,生物钟基因Perl和细胞周期基因p53、Cyclin D1、B1、CDK的昼夜节律均随着口腔颊黏膜癌变的发生发展而变化,即细胞周期和昼夜节律之间的相互作用与癌变的发生具有极为密切的关系.