溃结灵Ⅳ号对溃疡性结肠炎大鼠结肠组织中核因子－κB、肿瘤坏死因子－α的影响

目的：观察溃结灵Ⅳ号保留灌肠对三硝基苯磺酸（ TNBS）诱导的溃疡性结肠炎（ UC）大鼠结肠黏膜中核因子－κB（ NF－κB）的表达及肿瘤坏死因子－α（ TNF－α）含量的影响，探讨其治疗UC的可能机制。方法实验于2015年6—8月在哈尔滨工业大学生命科学与工程学院实验室进行。 SD大鼠138只，留取12只作为空白对照（ BC ）组，其余大鼠利用TNBS溶液灌肠法诱导制作UC大鼠模型，造模后随机分为模型对照（ MC ）组，溃结灵Ⅳ号低剂量（LD）组、中剂量（MD）组、高剂量（HD）组和阳性对照组美沙拉嗪（PC）组。 HD、MD、LD组分别采用溃结灵Ⅳ号高（40 g／kg）、中（20 g／kg）、低（10 g／kg）3个剂量保留灌肠给药，PC组使用美沙拉嗪（0．4 g／kg）进行灌肠给药，BC组及MC组给等体积的蒸馏水，采用免疫组化方法检测结肠黏膜中NF－κB蛋白表达，ELISA法测定TNF－α的含量以及对大鼠结肠损害评分等，观察溃结灵Ⅳ号保留灌肠对TNBS诱导的UC大鼠结肠组织的影响。结果（1）大肠结肠损伤程度：BC组大鼠结肠组织结构清晰，黏膜完整，肠腺丰富，排列紧密；MC组在造模后1周左右大鼠结肠组织损伤最重；结肠组织黏膜坏死脱落，溃疡形成，大量中性粒细胞浸润，腺体消失；PC、HD、MD、LD组给药后，大鼠结肠损伤程度都在逐渐减轻。 LD、MD、HD、PC组大鼠结肠组织均表现肠黏膜上皮脱落缺损减轻，溃疡区域明显减少，黏膜周围上皮增生修复，部分覆盖，炎细胞减少，肉芽组织增生显著。与MC组比较，HD、PC组大鼠结肠损伤减轻显著。（2）NF－κB蛋白表达：BC组大鼠结肠组织仅少量细胞胞质内可见黄色颗粒，MC组胞质胞核均可见棕黄色和褐色颗粒。随着给药时间的推移，各组大鼠结肠组织中NF－κB表达均有降低。与MC组比较，MD、HD、PC组NF－κB表达均降低明显（ P﹤0．05），LD组与MC组比较差异无统计学意义（ P ＞0．05）。（3）TNF－α含量比较：各组结肠组织中TNF－α含量均高于BC组，与MC组比较可知，造模后7 d，LD、MD、HD、PC组大鼠结肠组织中TNF－α仍有所升高，但从14 d开始，LD、MD、HD、PC组均有降低，其中PC、HD组与MC组相比有显著性差异，且LD、MD、HD组呈现明显的量效关系。结论溃结灵Ⅳ号保留灌肠对TNBS诱导的UC大鼠结肠有一定的保护作用，其机制可能与抑制NF－κB的表达及降低TNF－α炎性因子的含量有关。