5-Fu作用于瘢痕疙瘩成纤维细胞后Caspase-3变化的研究

目的：从蛋白层面证明瘢痕疙瘩、正常皮肤成纤维细胞中Caspase-3蛋白表达水平存在差异。通过5-fu(5-氟尿嘧啶)浓度梯度作用瘢痕疙瘩成纤维细胞后，观察细胞中Caspase-3蛋白的表达，及细胞增殖、迁移和侵袭性变化。方法：临床手术获取瘢痕疙瘩、正常皮肤组织块，培养瘢痕疙瘩成纤维细胞（keloid fibroblast KF）及正常皮肤成纤维细胞（normal skin fibroblast NSF），应用免疫组织化学及Western blot检测组织块及细胞中Caspase-3蛋白的表达；将5-fu(5-氟尿嘧啶)浓度梯度作用瘢痕疙瘩成纤维细胞（KF）后，应用Western blot检测Caspase-3蛋白的表达；CCK-8法检测KF细胞增殖情况；Trans-wells小室实验检测KF细胞的体外迁移和侵袭能力。结果：瘢痕疙瘩组织、正常皮肤组织、KF、NSF中均有Caspase-3蛋白的表达；KF中Caspase-3蛋白表达水平明显低于NSF，差异有统计学意义(P＜0.05)，瘢痕疙瘩组织块中Caspase-3蛋白表达水平明显低于正常皮肤组织，差异存在统计学意义（P＜0.05）；5-fu作用KF后，Western blot显示随着5-fu浓度的降低,KF中caspase-3蛋白表达减少,差异存在统计学意义(P＜0.05)。CCK-8结果显示，随着5-fu浓度的降低,对KF增值活性的抑制不断减弱，差异有统计学意义(P＜0.05)；Trans-well侵袭结果显示侵袭到下室的KF数目随5-fu浓度的不断降低，而增多。结论：Caspase-3在KF中的表达明显低于NS，同时是5-fu诱导KF凋亡的关键因子，5-fu以浓度依赖方式促进Caspase-3活性增高，同时抑制KF增值、侵袭、迁移等肿瘤特性。