体外诱导人脂肪间充质干细胞成管状结构的实验研究

目的 探索体外诱导人脂肪间充质干细胞成管状结构的可行性,为体外三维重建腺管样结构提供理论基础.方法 体外分离培养脂肪间充质干细胞,采用流式细胞仪检测细胞表面标记CD29、CD31、CD34、CD45、CD90、CD105的表达.经成骨诱导液(体积分数为10%胎牛血清,0.1μmol/L地塞米松,200μmol/L抗坏血酸,10mmol/L β-甘油磷酸钠,DMEM培养液)、成脂诱导液(体积分数为10%胎牛血清,1μmol/L地塞米松,200μmol/L吲哚美辛,0.5mmol/L IBMX,10mg/L胰岛素的DMEM培养液)、体外诱导脂肪间充质干细胞向骨细胞、脂肪细胞分化,并分别经碱性磷酸酶染色、油红O染色和鉴定.取培养至第3代的ADSCs,经含40ng/ml HGF 体积分数为10%胎牛血清 DMEM 诱导条件培养液,诱导ADSCs 在 Matrigel 胶中三维重建管状结构.结果 体外培养的人脂肪间充质干细胞呈梭形,生长增殖旺盛.流式细胞仪检测结果显示阳性表达:CD29、CD90、CD105阳性率分别为86.4%、97.7%、89.8%;CD31、CD34、CD45阳性率分别为4.1%、3.7%、2.3%,经成脂、成骨定向诱导分化后,细胞分别呈现脂肪细胞、骨细胞的表型特征.经40ng/mlHGF诱导培养5d后可在Matrigel胶中呈现管状结构特征.结论 脂肪间充质干细胞可望用于组织工程研究构建腺管样结构.