儿童神经母细胞瘤长链非编码RNA LINC00839表达与肿瘤增殖和预后关系

目的 神经母细胞瘤(neuroblastoma,NB)是儿童最常见的恶性实体肿瘤,约占儿童肿瘤的7％.近年来,长链非编码RNA(Long noncoding RNA,lncRNA)与肿瘤发生发展密切相关,但目前与NB相关的lncRNA作用机制、临床预后意义及潜在功能研究较少.本研究旨在探讨长链非编码RNA LINC00839在神经母细胞瘤中表达情况,并检测其对细胞增殖能力影响及与患儿预后关系,为NB治疗及预后评价提供理论依据和线索.方法 选取2015-05-12-2016-12-25北京儿童医院肿瘤外科确诊为NB患儿40例.综合利用NB公共数据库和本研究新收集的NB临床样本检测LINC00839在不同分期分级和不同v myc骨髓细胞瘤癌基因神经母细胞瘤衍生同源物(v myc avian myelocytomatosisviral oncogene neuroblastoma derived homolog,MYCN)扩增分组中的表达情况;分析LINC00839表达与NB患儿预后生存时间关联性;在神经母细胞瘤细胞系SH SY5Y中,使用siRNA瞬时敲降LINC00839,采用Real time PCR首先验证敲降效果,MTT检测其对细胞增殖能力影响,探讨LINC00839在肿瘤增殖中作用.结果 分析GSE62564数据集结果显示,LINC00839表达随NB分期增高而升高,且Ⅳ期NB中LINC00839表达与Ⅰ期(q=7.045,P＜0.001)、Ⅱ期(q=4.832,P=0.006)和Ⅳs期(q=6.570,P＜0.001)相比,差异有统计学意义;高危NBLINC00839表达水平高于低危组,t=8.068,P＜0.001;MYCN扩增NB中LINC00839表达水平高于无MYCN扩增的NB,t=11.620,P＜0.001.进一步分析GSE16237数据集结果显示,LINC00839表达在Ⅰ～Ⅳ期NB中同样具有上升趋势,而在Ⅳs期NB中表达较低,且Ⅳ期NB中LINC00839表达与Ⅰ期相比差异有统计学意义,q=4.192,P=0.038;MYCN扩增组NB肿瘤中LINC00839表达水平同样高于MYCN未扩增组,t=7.366,P=0.006.临床样本检测显示,LINC00839表达随着NB分期提高而升高,而且在Ⅳ期NB中其表达水平与Ⅰ期相比差异有统计学意义,q=3.953,P=0.038.SH-SY5Y细胞系中敲降LINC00839后,LINC00839基因表达明显降低,而且敲降组细胞增殖倍数在第48 h(q=0.498,P=0.026)和72 h(q=0.570,P=0.021)均低于对照组,差异有统计学意义.LINC00839高表达NB患儿事件生存率(event free survial,EFS)和总生存率(overall survival,OS)降低,x2=16.83,P＜0.001;x2 =43.11,P＜0.001,差异有统计学意义.结论 LINC00839在NB中高表达,可能通过细胞增殖促进NB恶性进展,同时LINC00839可评估NB患儿预后生存,是NB潜在的治疗靶点和预后判断指标.