初探紫杉醇诱导肝癌HepG2细胞凋亡中miR-224的表达

Chinese Journal Of Pharmaceutical Biotechnology(2014)

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摘要
肝癌是一种常见病和多发病,可分为原发性和继发性两大类.前者起源于肝脏的上皮或间叶组织,称为原发性肝癌,在我国发病率高、危害大;后者称为肉瘤,较为少见;指全身多个器官起源的恶性肿瘤侵犯至肝脏而形成.紫杉醇是一种从红杉属植物紫杉的树皮和树干中提取的天然抗癌药物,在临床上用于多种肿瘤的治疗;有独特的结构和作用机制;可以阻抑细胞周期于G2/M期并诱导细胞凋亡.细胞凋亡是受自身基因控制的、程序性的死亡,有体内和体外两个途径:死亡受体介导的外源途径和线粒体介导的内源途径.微小RNA是一类细胞中长度约为22个核苷酸的非编码小分子RNA,具有调控功能;主要参与基因转录后水平的调控.它们在细胞的增殖、死亡等过程中有重要的作用.miRNA基因的初级转录产物在核内和细胞质中分别经过两次切割产生成熟的miRNA,再与蛋白质一起组成RNA诱导沉默复合体,从而引起靶mRNA的降解或者抑制翻译.为了探讨紫杉醇诱导肝癌HepG2细胞凋亡时miRNA的作用,探讨其作用机制.用2,1,0.5 mg/L等不同浓度紫杉醇处理肝癌HepG2细胞后;通过Annexin-V和碘化丙碇双染;利用流式细胞术检测其细胞凋亡,通过实时定量PCR测定miR-224的表达.结果发现紫杉醇诱导HepG2细胞凋亡时,miR-224表达上调.上调的miR-224可能作用其靶基因,从而影响肝癌细胞的凋亡途径.
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关键词
Liver carcinoma,Paclitaxel,Human hepotoma cell line HepG,Apoptosis,MicroRNA-224,Real-time quantitative-PCR
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