LPS通过上调Toll样受体2和4表达增强IFN-α抗病毒效应的研究

目的探讨细菌脂多糖( LPS)对Toll样受体2和4(TLR2和TLR4)表达的影响及其在α-干扰素(IFN-α)抗病毒效应中可能发挥的作用及相关机制。方法以1000 IU/ml IFN-α和5 mg/L LPS单独及联合作用于HepG2细胞24 h后,运用RT-PCR和Western blot法分析作用前后细胞表面TLR2、TLR4和 IFN-α JAK-STAT 途径分子 STAT1、STAT2、IRF9表达情况,并进一步分析IFN-α诱导的 MyD88、MxA、2忆-5忆寡腺苷合成酶(2忆-5忆OAS)、双链RNA依赖性蛋白激酶( PKR)抗病毒蛋白的表达。结果 RT-PCR结果显示,IFN-α作用于HepG2细胞24 h后, TLR2、TLR4和STAT1、STAT2、IRF9信号分子及MyD88、抗黏病毒A蛋白( MxA)、2忆-5忆寡腺苷合成酶(2忆-5忆OAS)、PKR抗病毒蛋白的表达上升,而单独LPS处理细胞24 h后,除TLR2、TLR4 mRNA显著升高外( P<0.05),其他分子的表达均无显著变化；联合处理组较IFN-α处理组除MyD88和MxA mRNA水平无显著变化,其他分子的表达均显著升高( P<0.05)。 Western blot结果显示,与IFN-α处理组相比,联合处理组STAT1、STAT2蛋白表达显著增加(P<0.05),而MyD88蛋白表达无显著变化。结论 LPS可能通过上调细胞表面TLR2、TLR4的表达而发挥增强IFN-α诱导的抗病毒蛋白的表达水平,从而参与IFN-α抗病毒效应。