抑制T细胞CDK9对TLR5靶向监测同种异体移植排斥的影响

目的 探讨抑制T细胞中的细胞周期蛋白依赖性激酶9(CDK9)对Toll样受体5(TLR5)靶向监测同种异体移植急性排斥的影响.方法 Iodogen法碘化标记抗TLR5抗体(125I-anti-TLR5),体外实验分析特异性及稳定性,脾细胞与125I-anti-TLR5结合及解离实验分析脾细胞与标记物的亲和力;构建C57BL/6-SCID小鼠T细胞介导同种异体移植急性排斥模型,LDC000067(CDK9抑制剂)(5 mol/L)或等量PBS处理BALB/c小鼠T细胞并过继转输至模型小鼠,分为对照组(n=14)、抑制组(n=16),另有抑制组小鼠在注射125 I-anti-TLR5之前注射未标记抗TLR5抗体(10 mg/kg)为阻断组.观察抑制T细胞CDK9对同种异体移植物生存期影响及局部病理学改变;于对照组排斥高峰期时,对照组和抑制组小鼠尾静脉注射125I-anti-TLR5,分析生物学分布、动态全身磷屏自显影显像及标记物的TLR5靶向性.结果 抑制组移植皮片生存期(28.20±2.77)d,而对照组为(20.00± 1.58)d;炎性浸润明显减少,TLR5表达增加.制备的125I-anti-TLR5标记率达96.2％,体外稳定性良好(72h仍保持在90％以上).CDK9抑制剂体外处理后,受体鼠脾细胞与标记物的结合率增加,解离率降低(P均＜0.05).体内生物学分布研究表明,标记物主要经肝肾代谢,移植皮片放射性浓聚明显,抑制组72h靶/非靶比值(3.70±0.16)较对照组(2.02±0.06)增高(P＜0.05).全身磷屏放射自显影结果显示,注射后48 h移植皮片显影,抑制组较对照组显像明显,且放射性浓聚持续时间长,阻断组未见明显放射性浓聚.结论 抑制T细胞CDK9可明显延长同种异体移植物生存期,促进125I-anti-TLR5同种异体移植物局部浓聚,有利于体内TLR5靶向同种异体移植急性排斥监测.