外周血单个核细胞 hMLH1启动子甲基化与类风湿关节炎发生发展的关系

目的：探讨错配修复基因-hMLH1启动子甲基化及基因失活在类风湿关节炎( RA）发生发展中的作用。方法选取2006年4月—2007年4月河北医科大学附属第二医院及第三医院新诊断的RA患者33例为病例组，另选择同期河北省血液中心提供的健康人群38例为对照组。取受试者外周血，以密度梯度离心法分离外周血单个核细胞。分别以RT-PCR法、蛋白印迹法检测外周血单个核细胞hMLH1 mRNA、蛋白相对表达量。经亚硫酸氢钠修饰后，分别设计hMLH1启动子甲基化和非甲基化的DNA引物，检测病例组和对照组患者hMLH1启动子甲基化结果。结果病例组hMLH1 mRNA相对表达量为0.56(0.24，0.69），低于对照组的0.80(0.68，0.93），差异有统计学意义( Z＝-3.98， P＜0.05）。病例组hMLH1蛋白相对表达量为0.70(0.62，0.76），低于对照组的0.80(0.68，0.94），差异有统计学意义(Z＝-2.23， P＜0.05）。病例组hMLH1启动子甲基化阳性率为90.9％(30／33），高于对照组的13.2％(5／38），差异有统计学意义(χ2＝42.72， P＜0.05）。 hMLH1启动子甲基化程度与mRNA、蛋白相对表达量呈负相关(rs＝-0.866、-0.541， P＜0.01）。类风湿因子阳性患者hMLH1 mRNA、蛋白相对表达量低于阴性患者，差异有统计学意义(P＜0.05）；两者hMLH1启动子甲基化阳性率比较，差异无统计学意义(P＞0.05）。结论 hMLH1启动子甲基化可能是hMLH1基因失活的重要机制， hMLH1异常高甲基化可能参与了RA的发生发展。