人源性RUNX相关转录因子1在肾癌中的表达及生物学功能

Journal of Medical Postgraduates(2020)

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摘要
目的 人源性RUNX相关转录因子1(RUNX1)在肾癌中的作用报道较少.文中旨在研究RUNX1基因在肾癌中的表达及生物学功能.方法 从GEO数据库下载GSE66272肾癌芯片原始CEL文件,包括肾癌及癌旁组织样本,利用R软件对组织样本基因进行差异表达分析.选取2015年1月至2019年6月南通大学附属医院泌尿外科20份肾癌组织标本,另取对应癌旁组织标本.基因芯片分析RUNX1在肾癌组织中的表达.小干扰RNA 转染786-O细胞株,敲低RUNX1基因,将细胞分为:siRNA1 组(转染 si-RUNX1 的 siRNA1 序列)、siRNA2 组(转染 si-RUNX1 的 siRNA2 序列)、siRNA3 组(转染 si-RUNX1的siRNA3序列)、对照组(对照序列空载体siRNA转染).实时定量PCR测定RUNX1含量;细胞克隆形成实验统计细胞克隆形成数量;MTT法检测786-O细胞增殖活性;Transwell 肿瘤细胞侵袭实验分析细胞迁移数量;Western blot检测蛋白水平变化.结果 RUNX1在肾癌组织中的表达水平(1.95± 0.09)显著高于癌旁组织(0.62± 0.05),差异有统计学意义(P<0.01).siRNA1组、siRNA2组、siRNA3组的siRNA敲减效率显著低于对照组(P<0.01).MTT检测结果 显示,siRNA1组较对照组显著抑制786-O肾癌细胞的增殖(P<0.01).克隆形成结果 显示,siRNA1组786-O肾癌细胞的集落形成效率较对照组显着降低(P<0.003).siRNA1组的细胞过膜数量[(98.67±3.53)个/视野]明显低于对照组[(143.3±8.74)个/视野],差异有统计学意义(P<0.01).Western blot 结果 显示,siRNA1组RUNX1、N-cadherin、MMP9、p-AKT及p-GSK3β较对照组明显下降,E-cadherin明显增加.结论 RUNX1在肾癌组织的高表达可促进肾癌细胞的增殖和迁移,故RUNX1可作为肾癌的潜在临床诊治靶点及预后标志物.
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