黑鲷♀×真鲷♂反交子代与黑鲷的CaM基因克隆与mRNA表达分析

为分析黑鲷♀×真鲷♂(Acanthopagrus schlegelii♀×Pagrosomus major♂)反交子代在生长、发育等经济性状优于黑鲷亲本(A.schlegelii)的分子遗传差异,本研究克隆了反交子代(PA)与黑鲷(As)的CaM基因,运用生物信息学方法对基因PACaM与AsCaM的序列进行了详细分析;同时通过荧光定量分析了PACaM与AsCaM在仔鱼及2龄成鱼不同组织的表达特征.研究结果表明,PACaM基因cDNA全长1180 bp,AsCaM基因cDNA全长1241 bp,均具有一个450 bp的开放阅读框,编码149个氨基酸,分子量约16.84 kD,等电点为4.09;序列比对、结构比较等分析表明,PACaM和AsCaM属CaM基因家族,具有4个EF-hand钙结合功能域.定量分析表明CaM在两种鱼的仔鱼及成鱼的脑与性腺中有较高表达;PACaM和AsCaM在仔鱼及成鱼的鳃、肌肉及性腺中的表达存在显著差异(P<0.05),在脑、肝及肾中的表达没有明显差异(P>0.05);PACaM在仔鱼中表达量最高,AsCaM在成鱼性腺中表达最高,均显示了CaM基因在生长与繁殖中的重要作用.研究结果为鲷科属间杂交获得的子代与亲本性状差异的功能基因表达提供一些基础资料.