Citrulline et réponse inflammatoire dans les cellules RAW 264.7

Introduction et but de l’etude Nos travaux in vivo et ex vivo mettent en evidence des effets anti-inflammatoires de la citrulline (Cit) dans differents modeles de steatose hepatique non alcoolique (NAFLD). Il a par ailleurs ete montre que la Cit agissait sur les macrophages isoles de rats âges en attenuant leur phenotype inflammatoire, et en particulier la production de NO. Les effets anti-inflammatoires de la Cit au cours de la NAFLD pourraient impliquer son action sur les macrophages du foie, les cellules de Kupffer. Nous avons donc evalue les effets de la Cit sur des cellules RAW 264.7, une lignee validee comme modele de cellules de Kupffer. Materiel et methodes Une lignee de macrophages murins (RAW 264.7) a ete cultivee en presence ou en l’absence de Cit (2 mM) et soumise ou non a un stress inflammatoire (50 ng/mL de lipopolysaccharide [LPS]), pendant 3, 6 ou 24 h. L’expression de genes de l’inflammation ( Tlr4, Il6, Tnfα, iNos, Il10, Il4 ) a ete evaluee par RT-qPCR. Nous avons mesure la production de NO (methode de Griess a la nitrate reductase) et celle de TNFα par ELISA. L’analyse statistique a ete realisee par Anova a deux voies suivi d’un test de Tukey. Seuil de significativite : p  ≤ 0,05. Resultats et analyse statistique La Cit seule entrainait une augmentation d’expression d’ Il10  a 6 h. Cet effet disparaissait en presence de LPS. Le LPS induisait une augmentation de l’expression d’ Il6  et de Tnfα des 3 h de traitement, avec un maximum a 24 h ( p  ≤ 0,05), et la Cit diminuait significativement cette expression ( p  ≤ 0,05). L’expression d’ iNos et d’ Il4  n’etait augmentee par le LPS qu’apres 24 h de traitement, et etait significativement diminuee en presence de Cit ( p  ≤ 0,05). La production de NO et de TNFα etaient significativement augmentee en presence de LPS et attenuee en presence de Cit apres 24 h de traitement ( p  ≤ 0,05). Conclusion La citrulline attenue la reponse au LPS des cellules RAW 264.7. Des etudes de co-culture permettront de comprendre les interactions entre les hepatocytes et les cellules de Kupffer et l’influence de la Cit sur celles-ci au cours de la NAFLD.