Détermination des ECV pour trois espèces d’Aspergillus par la méthode « Normalized Resistance Interpretation » au CHU de Bordeaux

Malgre la determination de seuils d’interpretation cliniques par l’EUCAST et le CLSI, les seuils epidemiologiques (ECOFF/ECV) demeurent utiles pour l’etude de la sensibilite aux antifongiques, en particulier pour les Aspergillus . Les breakpoints cliniques (determines pour les techniques de references en milieu liquide et non pour la technique Etest) n’existent pas pour toutes les especes ni pour tous les antifongiques utilises. Entre octobre 2014 et decembre 2016, la sensibilite aux antifongiques de 359 souches d’ Aspergillus a ete etudiee par technique Etest (bioMerieux). L’identification des isolats a ete realisee au niveau de l’espece par spectrometrie de masse MALDI-TOF (MicroFlex, Bruker Daltonics) a l’aide d’une base de donnee collaborative implementee [1] . Trois cent deux souches ont ete inclues dans l’analyse statistique (263  A. fumigatus , 20  A. niger et 19  A. flavus ), les 57 autres isolats (19 especes differentes) etant exclus (effectif trop faible par espece). La sensibilite aux antifongiques a ete evaluee prospectivement pour cinq antifongiques : amphotericine B (AmB), caspofungine (CAS), itraconazole (ITZ), posaconazole (PSZ) et voriconazole (VRZ). Les CMI ont ete determinees par lecture visuelle de l’ellipse d’inhibition a 24 h (AmB et CAS) et a 48 h (Azoles). Les ECV ont ete determines par la methode Normalized Resistance Interpretation (NRI) [2] . Pour A. fumigatus ( n  = 263), les ECV etaient concordants aux seuils de l’EUCAST [3] et/ou aux CMI90 rapportees par le CNRMA [4] . Seules 1,9 % ( n  = 5) des souches avaient une CMI pour l’ITZ superieure a l’ECV, 1,1 % ( n  = 3) pour le PSZ, et 1,1 % ( n  = 3) pour le VRZ. Pour A. niger ( n  = 20), l’ECV de l’ITZ a ete calcule a 4 mg/L (non etabli pour l’EUCAST [NE], ≥ 8 mg/L pour la CMI90 du CNRMA), et 0,032 mg/L pour la CAS (NE, 0,5 mg/L). Pour A. flavus ( n  = 19), l’ECV etait de 2 mg/L pour l’AmB (NE, 2 mg/L). L’ensemble des autres ECV etaient concordants. Les Aspergillus testes demeurent donc largement sensibles aux antifongiques. Comme decrit dans la litterature, les CMI pour l’ITZ d’ A. niger etaient plus elevees que celles retrouvees pour A. fumigatus , celles pour l’AmB d’ A. flavus etaient elevees. Une etude moleculaire est en cours afin de decrire les mecanismes de resistance impliques chez A. fumigatus .