Diagnostic des hémoglobinopathies par spectrométrie de masse

Cet article presente trois methodes d’analyse des proteines intactes par spectrometrie de masse appliquees de maniere combinee au diagnostic des maladies de l’hemoglobine ou hemoglobinopathies. La premiere methode est basee sur l’analyse selective de couples ion precurseur – ion produit (« selected reaction monitoring » (SRM)) dans une trappe d’ions et utilise une technique particuliere d’activation des ions precurseurs appelee « electron transfer dissociation » (ETD). Elle permet l’identifi cation specifi que de variants de l’hemoglobine selectionnes pour leur prevalence et leur importance clinique. La seconde methode a ete developpee sur le meme instrument pour la quantifi cation de l’hemoglobine A2. Les ions precurseurs d’interet sont isoles puis detectes sans activation, permettant d’augmenter le rapport signal/bruit et d’atteindre un niveau de precision analytique compatible avec les exigences cliniques. La troisieme methode utilise un spectrometre de masse a haute resolution de type Qq-TOF avec activation ETD pour la caracterisation de variants rares de l’hemoglobine. Cette approche permet la localisation de la sequence mutee dans la chaine d’hemoglobine etudiee. Tous les developpements methodologiques presentes ont ete realises avec comme objectif que l’acquisition, l’analyse et l’interpretation des donnees puissent etre adaptees a un environnement clinique.