Mise au point du dosage sanguin des métabolites de la voie du tryptophane en HPLC-MS/MS et perspectives dans le suivi biologique des patients atteints de phénylcétonurie

Introduction Le metabolisme du tryptophane (Trp) comporte 2 grandes voies metaboliques, celle de la kynurenine (KYN) et celle de la serotonine (5HT). Ces voies sont primordiales dans les maladies cardiovasculaires, la tolerance immune ou certaines pathologies neurodegeneratives telles que la maladie d’Alzheimer. Dans le cadre de la phenylcetonurie (PCU; OMIM 261600), une diminution du metabolisme cerebral du 5HT a ete montree, tandis que la voie des kynurenines a ete tres peu exploree. Pourtant plusieurs points rapprochent la PCU et le metabolisme du Trp: le transporteur des L-acides amines type 1, commun au Trp et a la phenylalanine (Phe), l’inhibition de la Trp hydroxylase (qui permet la synthese de 5-hydroxytryptophane) par une forte concentration de Phe, ou encore le BH 4 , cofacteur indispensable a la Phe hydroxylase et a la Trp hydroxylase. Objectif Decrire les modifications eventuelles du catabolisme du Trp dans cette amino-acidopathie, en supposant que les modifications cerebrales deja decrites possedent un retentissement au niveau sanguin. Materiel et methodes Au sein du departement de biochimie, toxicologie et pharmacologie du CHU de Grenoble, nous avons mis au point et valide une methode de dosage du Trp et de 8 de ses metabolites (couvrant a la fois la voie du 5HT et celle de la KYN) par chromatographie liquide haute pression couplee a de la spectrometrie de masse en tandem ( Figure 1 ). Resultats Lors d’une etude preliminaire, nous avons dose ces metabolites dans le plasma de 6 patients PCU adultes non traites. Nous avons ainsi pu mettre en evidence des concentrations differentes dans les plasmas des patients atteints de PCU par rapport a notre population de reference, telle qu’une diminution significative ( p -value ≤ 0,005) du ratio KYN/Trp. Cette diminution semble due a une augmentation du catabolisme de la KYN (ratios metabolite/KYN significativement augmentes dans la population PCU). De plus, le 5-hydroxytryptophane etait non quantifiable chez les patients PCU, a la difference de la population de reference. Enfin, le ratio 5HT/Trp se trouve augmente dans notre population PCU ( p -value ≤ 0,001). Discussion/conclusion Ces donnees preliminaires nous encouragent a poursuivre nos investigations afin de montrer l’impact de la PCU sur la voie catabolique du Trp et de confronter nos resultats aux modeles physiopathologiques de la litterature.