核苷类逆转录酶抑制剂对血管生成和淋巴管生成的作用和机制研究

目的:鸡尾酒疗法使得HIV阳性病人面对的临床挑战从免疫缺陷转移到心血管疾病等慢性疾病。然而,鸡尾酒疗法在生理性血管生长中的作用并不清楚。本文研究了鸡尾酒疗法骨干药物——核苷类逆转录酶抑制剂(NRTIs)对血管和淋巴管生成的影响。方法:利用体外细胞生长检测研究内皮细胞的凋亡、增殖和迁移,体内耳部和胶栓模型研究血管/淋巴管生成,Western blot检测信号通路,免疫荧光显微镜技术检测膜受体内吞。结果:药理浓度下,3种不同类型的NRTIs药物(TDF、AZT和3TC)在体内和体外都可以通过影响内皮细胞的增殖与迁移抑制血管和淋巴管生成。相对应的,NRTIs显著抑制了血管内皮中VEGFR2和FGFR1信号通路以及淋巴管内皮中VEGFR3信号通路,并且NRTI对受体酪氨酸激酶(RTK)信号通路的调控具有专一性。但是,3种NRTIs对RTK信号通路的负调控作用机制不同:AZT通过抑制RTK蛋白的成熟;而TDF和3TC则通过抑制RTK受体进入EEA1内吞小泡调控RTK的内吞。另一方面,我们发现NRTIs直接引起线粒体功能的紊乱,导致内皮细胞产生过量的线粒体来源ROS。线粒体ROS清除剂Mn TMPy P可以有效逆转NRTIs导致的内皮细胞血管生成和淋巴管生成的功能障碍。结论:NRTIs引起细胞线粒体中产生过量的ROS,从而损伤内皮细胞的RTK信号通路,最终负向调控血管生成和淋巴管生成。