线粒体融合蛋白-2在肝硬化及慢加急性肝衰竭大鼠中的表达

目的 比较肝硬化、慢加急性肝衰竭和正常大鼠肝组织线粒体融合蛋白2(Mfn2) mRNA和蛋白的表达差异,检测大鼠肝组织中三磷酸腺苷(ATP)、活性氧(ROS)的含量,探讨Mfn2表达差异在肝硬化及肝衰竭发生和发展过程中的意义.方法 通过腹腔注射四氯化碳植物油溶液建立大鼠肝硬化模型,在肝硬化基础上给予LPS/D-Ga急性攻击建立慢加急性肝衰竭大鼠模型,腹腔注射植物油建立正常对照组.正常对照组(NC组,n=10),肝硬化组(LC组,n=15),慢加急性肝衰竭组(LF组,n=15).Western blot法及免疫荧光法观察不同模型组大鼠肝组织中Mfn2的表达,实时荧光定量法检测不同模型肝组织中Mfn2 mRNA的表达,荧光分光光度法测定各组肝组织中ROS含量;生物发光法测定肝组织中ATP含量.数据统计计量资料以均数±标准差(-x±s)表示,样本均数比较用单因素方差分析,变量间相关性应用Pearson相关分析,回归分析采用直线回归方法.结果 Mfn2 mRNA在LC组、LF组肝组织中的的表达显著减低,相对表达量分别为(2.25±0.1)× 106、(0.95±0.5) ×106,与NC组的(2.67±0.4)×106比较,f值分别为-51.75,-6.73,P值分别为0.88、0.001,LC组与NC组比较,差异无统计学意义,LF组与NC组间差异有统计学意义;3组比较,F=451.30,P＜0.05,差异有统计学意义.Mfn2蛋白在LC组、LF组肝组织中的的表达显著减低,相对表达量分别为0.051±0.004、0.037±0.007,与NC组的0.254±0.008比较,t值分别为-19.41、-6.064,P值均＜0.05,差异有统计学意义;3组比较,F=444.98,P＜0.05,差异有统计学意义.与NC组比较,LC组、LS组ATP含量减少,ROS含量明显增加.Mfn2蛋白的表达与ATP含量呈正相关(r=0.982),Mfn2蛋白表达与ROS含量呈负相关(r=-0.803).结论 肝硬化、慢加急性肝衰竭大鼠模型中,肝组织中Mfn2表达降低引起ATP的合成减少,ROS产生增多,Mfn2表达减少与肝硬化、肝衰竭发生过程中能量代谢障碍有关.Mfn2蛋白的表达量与肝损伤程度相关.