猪脱细胞血管基质的制备及其生物学性状检测

背景:目前脱细胞血管基质的制备方法有酶消化法和去污剂法.十二烷基硫酸钠为离子型去垢剂,脱细胞效果强,但易引起较多蛋白纤维损伤,影响血管的结构和力学特性.Triton X-100为柔和的非离子型去垢剂,两者联合应用可减少纤维损伤.目的:采用酶、非离子型和离子型去垢剂联合法制备猪脱细胞血管基质,并检测其生物学性状.设计、时间及地点:对比观察的细胞学实验,于2007-08/2008-05青岛市市立医院心脏中心实验室完成.材料:雄性幼猪1只.取其胸主动脉用于制备脱细胞血管基质.方法:采用含双抗的0.125%胰蛋白酶、1%Triton X-100、1%十二烷基硫酸钠逐步处理猪胸主动脉.主要观察指标:苏术精-伊红染色观察细胞脱除情况.扫描电镜、透射电镜观察细胞脱除情况及胶原纤维和弹性纤维情况.测定脱细胞血管基质中胶原蛋白含量,检测血管脱细胞血管基质的伸长比、极限应力.结果:经该法处理的猪血管内细胞全部脱除,胶原纤维、弹性纤维无断裂,细胞外基质保持完好,其胶原蛋白含量和力学性状与新鲜组织无明显差别.结论:酶、非离子型和离子型去垢剂联合法是制备脱细胞血管基质的较好方法,制备获得的脱细胞血管基质生物学性状保持良好.