MDA-MSP技术检测粪便miR34b/c甲基化及其在结直肠癌早期诊断中的意义

目的:探讨粪便miR34b/c甲基化状态的检测在结直肠癌早期诊断中的意义.方法:从126例结直肠癌患者癌组织、癌旁组织、粪便和64例正常对照者的粪便中分别提取DNA,采用多重置换扩增(multiple displacement amplification,MDA)技术对经过亚硫酸氢盐修饰样本进行全基因组扩增,结合甲基化特异性PCR(methylation-specific PCR,MSP)检测组织和粪便中miR34b/c基因甲基化状态.结果:结直肠癌癌组织miR34b/c基因的甲基化阳性率为95.2％(120/126),对应的癌旁正常组织为11.9％(15/126),两者比较有显著差异(P＜0.01); miR34b/c甲基化状态与各临床病理参数无显著相关(P＞0.05).结直肠癌粪便miR34b/c甲基化阳性率为90.2％(111/123),显著高于正常对照7.8％(5/64),差异有统计学意义(P＜0.01).粪便DNA miR34b/c用于结直肠癌早期诊断的敏感性为91.2％,特异性为92.2％.结论:miR34b/c甲基化是结直肠癌的重要分子特征,检测粪便miR34b/c甲基化有望成为结直肠癌早期诊断的一个全新的肿瘤标志物.MDA结合MSP为miRNA的甲基化分析提供了一种较理想的研究手段.