Développement et validation d’une méthode de criblage en LC-MS/MS : application à l’analyse des résidus de seringues usagées du réseau ESCAPE à Paris

Objectifs L’usage de substances psychoactives par voie intraveineuse (IV) représente une préoccupation de santé publique associée à un surrisque d’overdoses et de transmission des maladies infectieuses. L’analyse des résidus de seringues usagées offre une source d’information plus précise sur la nature des substances injectées, comparativement aux déclarations des utilisateurs. L’objectif de cette étude a été le développement et la validation d’une méthode permettant de rechercher 340 substances psychoactives et produits de coupe (hors insuline) par LC-MS/MS dans des résidus de seringues usagées collectés à Paris par le réseau ESCAPE (European Syringe Collection and Analysis Project Enterprise). Méthode Cent quarante-neuf seringues ont été collectées en 2023 à partir des distributeurs automatiques de seringues provenant de 5 sites parisiens : Gare du Nord (GDN), Gare de Lyon (GDL), Gare St Lazare (GSL), Gare Montparnasse (GMP) et la station RER Kennedy (SRK). Les seringues ont été rincées 3 à 5 fois avec 1mL de méthanol. La préparation automatisée des échantillons a été réalisée en 45minutes sur un robot TECAN EVO 100 équipé du logiciel Freedom Evoware 2. Une dilution au 10e des échantillons dans du méthanol a été réalisée sur une plaque 96 puits de type deepwell. Sur une seconde plaque, le robot dispense dans chaque puit 20μL d’une solution d’étalons internes deutérés, 20μL d’échantillon préalablement dilué, et 160μL de tampon formiate 2mM. La plaque est ensuite analysée par LC-MS/MS sur un triple quadrupôle (TSQ Altis, Thermo Fisher®) en mode MRM. Une calibration à un point (100ng/mL), a été utilisée pour établir les limites de détection (LDD) et de quantification (LDQ). Le logiciel TraceFinder a été paramétré pour une discrimination automatique des résultats positifs en utilisant la LDD comme seuil de signalement (dit de reporting). Résultats Le seuil de signalement a été évalué à 1ng/mL pour tous les composés, permettant la détection de substances à l’état de trace (teneur de 0,01 % en principe actif, basée sur une concentration injectée estimée à 1g/L). La LDQ varie entre 10 et 25 ng/mL selon les molécules, avec des biais et des CV≤20 %. Quatre-vingt-douze pourcent des seringues (n=137) étaient positives à une des 42 substances détectées, avec une prédominance des cathinones (60 %, n=88, chloromethcathinone CMC (n=81), methylmethcathinone MMC (n=42), et chlorodimethyl cathinone CDMC (n=20), suivies des opioïdes (43 %, n=64) et de la cocaïne (25 %, n=38). L’injection de cathinones et de cocaïne semble être une pratique courante lors des sessions de chemsex, comme l’indiquent les résultats de l’enquête nationale menée par la SFTA en 2023. L’utilisation d’opioïdes est principalement associée à l’injection d’héroïne. Les résultats indiquent des habitudes de consommation distinctes à travers Paris. Par exemple, la CMC est prédominante à GSL, GDL et SRK, tandis que la cocaïne est plus couramment utilisée à GDN et GMP. Cela souligne l’importance d’une approche localisée dans la prise en charge de ces usagers. La présence de 2 à 16 substances différentes dans 63 % des seringues (soit 94 seringues) pourrait indiquer une réutilisation des seringues, ce qui expose les utilisateurs à un risque de transmission de maladies infectieuses. Cependant, certaines substances présentes à l’état de traces pourraient provenir d’une contamination par le sang lors de l’injection. Conclusion La méthode de criblage par LC-MS/MS, combiné à l’automatisation des processus de préparation des échantillons et de génération des résultats, nous a permis d’analyser rapidement de grandes séries d’échantillons, et d’identifier les substances les plus fréquemment injectées à Paris. L’analyse des résidus de seringues représente un outil de surveillance sur les habitudes de consommation ainsi que de prévention et de réduction des risques.