健脾化瘀方对TGF-β1诱导的肝癌细胞迁移侵袭及上皮间质转化的影响

目的:探讨健脾化瘀方对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的肝癌细胞MHCC-97H上皮间质转化(EMT)及侵袭转移能力的影响.方法:将不同浓度(0.5、1、2、4、8μmol/L)的健脾化瘀方作用于肝癌细胞MHCC-97H,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法评估细胞活力;TGF-β1诱导肝癌细胞建立EMT模型,倒置显微镜观察细胞形态的变化;根据加入不同浓度健脾化瘀方干预,将实验分为空白组、EMT组、EMT+健脾化瘀方2 mg/mL组(低浓度组)、EMT+健脾化瘀方4 mg/mL组(高浓度组);划痕法和Transwell实验检测肝癌细胞侵袭/迁移能力;Western Blot法检测EMT标志蛋白E-cadherin、N-cadherin和Vimentin蛋白表达水平.结果:健脾化瘀方能抑制肝癌细胞MHCC-97H的增殖,并呈一定的时间-剂量依赖关系(P＜0.01).显微镜下观察经过TGF-β1诱导后的肝癌细胞形态松散,呈梭形样改变.与空白组比较,EMT组的迁移/侵袭能力显著增强(P＜0.01),给予药物干预后,高、低浓度组的迁移/侵袭能力较EMT组显著减弱(P＜0.01).与空白组比较,EMT组细胞中的E-cadherin蛋白表达显著降低(P＜0.01),N-cadherin和Vimentin蛋白表达显著升高(P＜0.01);高、低浓度组E-cadherin蛋白表达显著上调(P＜0.01),而N-cadherin和Vimentin蛋白表达显著下调(P＜0.01).结论:健脾化瘀方能抑制TGF-β1诱导的肝癌细胞MHCC-97H的迁移/侵袭能力,其机制可能与抑制上皮间质转化有关.