狂犬病病毒脑内感染MyD88-/-小鼠对肺脏病理变化的影响

[目的]明确狂犬病病毒(RABV)脑内感染MyD88基因敲除(MyD88-/-)小鼠对肺脏病理变化的影响,探索MyD88基因缺失对狂犬病发病进程的延迟作用,为进一步揭示RABV的致病机理打下基础.[方法]以RABV的弱毒株rRC-HL和标准强毒株CVS-24分别脑内感染MyD88-/-和野生型(MyD88+/+)小鼠,攻毒剂量1000 FFU/只,以相同方式和剂量接种DMEM作为对照.观察脑内感染后小鼠的临床症状及体质量变化,采集脑内感染后第4和7d的脑组织和肺脏,通过实时荧光定量PCR检测小鼠脑组织及肺脏内病毒基因和细胞因子的表达情况,并制作肺脏组织切片观察其病理变化.[结果]MyD88+/+和MyD88-/-小鼠脑内感染弱毒株rRC-HL后出现轻微的临床症状,而标准强毒株CVS-24对MyD88+/+和MyD88-/-小鼠均具有致死性.与MyD88+/+小鼠相比,MyD88-/-小鼠的发病时间和死亡时间均延迟1～2 d,弱毒株rRC-HL脑内感染2种小鼠均从第10d开始恢复体质量,且临床症状逐渐消失,但MyD88-/-小鼠较MyD88+/+小鼠恢复得更快.脑内感染RABV后,小鼠脑组织相关细胞因子(IFN-α、IFN-γ、IL-1β、MCP-1和TNF-α)的表达发生明显变化,而在肺脏中的表达差异倍数只有少部分超过2.00倍,且随感染时间的推移其变化呈现不规律性.濒死期小鼠肺脏组织切片观察发现,MyD88+/+小鼠肺脏组织切片的细胞核染着色深,肺泡壁稍微增厚,有轻微炎症变化,有巨噬细胞出现;MyD88-/-小鼠肺脏组织切片的细胞核着色浅,肺泡壁增厚不明显,炎症变化较轻,有少量巨噬细胞浸润.[结论]脑内感染后第7d是RABV在小鼠脑组织中复制能力最强的时段,且脑组织相关细胞因子的表达差异倍数随病程的推移发生明显变化;肺脏组织切片并未发现典型的特征性病理变化,但RABV感染对MyD88-/-小鼠肺脏病理的影响小于MyD88+/+小鼠,即MyD88基因缺失有利于小鼠对抗RABV感染,抑制炎症产生及延迟机体发病.