柑橘13个多胚品种同源四倍体高效发掘与分子鉴定

[目的]基于柑橘珠心细胞存在自然加倍的特点,实生播种发掘千山红蜜橘等13个品种的同源四倍体.[方法]种子催芽萌发后实生播种,待幼苗长出3片以上真叶后,依据形态特征初选法"观根辨叶看油胞"从实生苗中筛选疑似多倍体,再通过流式细胞仪倍性分析与根尖染色体压片计数对疑似多倍体进一步鉴定倍性,并通过SSR分子标记分析鉴定所获多倍体的遗传来源.[结果]基于形态初选,分别从9个地方特色品种千山红蜜橘、八月橘、衢橘、早橘、扁平橘、瓯柑、狮头柑、冰糖橙、锦蜜冰糖橙和4个砧木品种磨坪香橙、日本香橙、枳雀、油皮金柑的343、499、892、385、519、290、457、241、119、690、828、114、129株实生苗中发掘获得2、1、3、2、7、3、1、3、1、3、17、1、2株疑似多倍体;用流式细胞仪对以上46株疑似多倍体进行倍性鉴定,获得45株四倍体和1株衢橘六倍体,采用根尖染色体计数法验证了上述结果;SSR分子鉴定表明,13个品种的45株四倍体所扩增条带大小与其相应二倍体亲本完全一致,推测其可能是由二倍体亲本珠心细胞自然加倍形成的同源四倍体.[结论]发掘的四倍体资源不仅丰富了我国柑橘多倍体类型,而且为我国柑橘无核育种和矮化广适砧木选育奠定了珍贵的材料基础.