松材线虫谷胱甘肽S转移酶基因响应阿维菌素胁迫功能研究

[目的]由松材线虫Bursaphelenchus xylophilus引起的松材线虫病严重破坏东亚和欧洲等多个国家和地区的森林生态系统.[方法]本研究从松材线虫基因组中获取Bx-gst12,随后对该基因的全长CDS区域进行基因克隆和序列分析、同时通过生物信息学方法对Bx-gst12 所编码的蛋白质Bx-GST12 的理化性质、亲疏水性、跨膜区、二级结构和三级结构进行了预测和分析.并通过基因干扰技术对Bx-gst12 干扰后,分析该基因在松材线虫对阿维菌素敏感程度的影响.[结果]生物信息学结果显示Bx-GST12 蛋白稳定系数为 28.96,亲水系数为-0.412,三级结构预测Bx-GST12 蛋白具有含有 9 个α螺旋和 5 个β折叠,但不具有跨膜结构域.应用基因干扰技术对Bx-gst12 基因进行基因干扰,干扰后的Bx-gst12 基因表达量变为原来的 25.14%.阿维菌素溶液生物测定实验结果表明,Bx-gst12 干扰后的松材线虫死亡率明显高于对照组,松材线虫死亡率平均提高了 7.12%.[结论]本研究成功克隆Bx-gst12 基因并对该基因的dsRNA进行了设计与合成.Bx-gst12 基因干扰显著影响了松材线虫对阿维菌素的敏感性,在相同浓度的阿维菌素胁迫相同时间中,干扰组线虫死亡率明显高于对照组,表明Bx-gst12基因在松材线虫药物代谢过程中发挥着显著作用.