响应面法优化VitroGel体系上人源肝细胞三维培养条件的研究

目的 通过响应面法优化基于VitroGel体系的人源肝细胞(L02细胞)三维培养条件,构建体外肝细胞模型.方法 L02细胞采用VitroGel系统进行三维培养.通过单因素实验确定3个关键因素(接种细胞浓度、培养时间和水凝胶稀释度)的适宜水平,再通过响应面法分析确定基于VitroGel系统的人源肝细胞三维培养的最佳条件.使用Cell Counting Kit-8(CCK-8)法检测细胞活力.通过荧光染色测试测量L02细胞的增殖性能和死活情况.结果 基于VitroGel系统的人肝细胞最佳培养条件为接种细胞浓度为1.1×105/mL,培养时间为9.5 d,水凝胶稀释度为1∶3.7.在此条件下,细胞活性的OD值为2.13,与理论值2.17的相对误差仅为1.84％,表明该条件合适可靠.荧光染色和死活细胞检测证明三维肝细胞模型构建成功.结论采用响应面法确定了基于VitroGel体系的人源肝细胞三维培养的最佳条件,成功构建了具有高细胞活性的肝细胞模型.