LncRNA SNHG16通过靶向miR-421/MPC-1轴改善脓毒症诱导的肾炎和细胞凋亡

目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)SNHG16对脓毒症诱导的肾细胞炎症和细胞凋亡的改善作用与机制.方法:应用内毒素脂多糖(LPS)在体外诱导人近端肾小管上皮细胞(HRPTEC)构建脓毒症样肾细胞模型,细胞分为对照组和LPS组.将LPS组的HRPTEC分为SNHG16过表达组(LPS+SNHG16组),过表达空载体组(LPS+vector组),SNHG16过表达联合miR-421 拟似物处理组(LPS+SNHG16+miR-421 mimic组),SNHG16过表达联合线粒体丙酮酸载体-1(MPC-1)小干扰RNA(siR-NA)沉默处理组(LPS+SNHG16+si-MPC-1组).应用荧光素酶报告基因检测验证miR-421序列与SNHG16序列的结合情况以及miR-421与MPC-13'-UTR的结合情况.用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测各组HRPTEC中SNHG16和miR-421表达水平,western blotting检测各组HRPTEC中cleaved-caspase 3、Bcl-2、MPC-1的表达水平,细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测各组HRPTEC的增殖率,流式细胞术检测细胞凋亡率.酶联免疫吸附实验(ELISA)检测各组细胞培养上清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)的水平.结果:与对照组比较,LPS组的细胞增殖率降低(P＜0.05),细胞凋亡率增加(P＜0.05),细胞中miR-421、cleaved-caspase 3和Bcl-2的表达增加(均P＜0.05),而细胞中SNHG16和MPC-1的表达减少(均P＜0.05),细胞培养上清中TNF-α、IL-1β、IL-6的表达增加(均P＜0.05).LPS处理联合SNHG16过表达增加了细胞增殖率(P＜0.05),减少了细胞凋亡(P＜0.05),抑制了细胞培养上清中TNF-α、IL-1β、IL-6的表达(均P＜0.05).而SNHG16组的上述作用均被miR-421-mimic部分逆转(P＜0.05).在LPS+SNHG16中加入si-MPC-1后,LPS+SNHG16组的上述作用均被si-MPC-1部分逆转(均P＜0.05).结论:LncRNA SNHG16通过靶向miR-421/MPC-1轴改善脓毒症诱导的肾细胞炎症和细胞凋亡.