Barx2驱动口腔鳞状细胞癌肿瘤特异性MHC-Ⅱ类信号诱导CD4+T/CD8+T细胞活化

目的:探究BarH-样同源框蛋白 2(BarH-like homeobox 2,Barx2)通过促进 MHC Ⅱ类信号通路杀伤肿瘤细胞的机制.方法:(1)通过高通量测序,qPCR和Western Blot实验分析Barx2 过表达的OSCC细胞系中CⅡTA/MHC-Ⅱ信号轴相关分子的表达量;(2)双荧光素酶实验验证Barx2 与CⅡTA pⅢ启动子的结合;(3)提取人外周血单核细胞(PBMC),分别与对照组和Barx2 过表达组肿瘤细胞共培养.共培养后,结晶紫染色检测肿瘤细胞的数量;应用CFSE染色标记及流式细胞学实验分析PBMC中 CD4+ T 细胞和 CD8+ T 细胞增殖活性.结果:(1)高通量转录组测序结果结合 GSEA-基因集富集分析和 KEGG 信号通路分析发现,过表达 Barx2 上调了抗原加工与提呈通路 MHC-Ⅱ信号分子相关因子;在Barx2 过表达细胞系中,qPCR及 Western blot进一步验证了上述基因表达的显著上调;(2)Barx2 能直接与CⅡTA pⅢ启动子上游结合,促进主要表达于淋巴细胞的 CⅡTA转录本的转录.(3)肿瘤细胞与PBMC共培养后,Barx2 过表达肿瘤细胞的增殖被显著抑制;过表达 Barx2 的肿瘤细胞显著促进了CD4+T和CD8+T细胞的增殖活性.结论:Barx2 通过驱动 CⅡTA/MHC-Ⅱ信号轴活化,促进肿瘤细胞表达以HLA-DR为主的MHC-Ⅱ类分子,从而活化CD4+T细胞和CD8+T细胞,发挥杀伤肿瘤细胞的作用.