无载体ROS响应性纳米药物对缺血性脑卒中的治疗作用

目的 研究无载体CTC-Met纳米药物对于急性缺血性脑卒中(AIS)的保护作用.方法 通过酯化反应合成并表征ROS响应性CTC分子,然后利用反溶剂沉淀法制备CTC-Met纳米药物,并对其脑靶向、安全性和抗氧化性进行检测;以雄性C57BL/6J小鼠为研究对象,构建小鼠右侧大脑中动脉阻塞(MCAO)模型,灌注同时ip给予10 mg·kg-1姜黄素、二甲双胍和CTC-Met纳米药物,分别评价各组小鼠TTC脑梗死体积、神经功能障碍及皮层神经元尼氏体形态完整性;采用N2a细胞系构建OGD/R体外脑缺血模型后给予1 μmol·L-1 姜黄素、二甲双胍和CTC-Met纳米药物,检测GPX4、FTH1和脂质过氧化活动改变.结果 1757 cm-1红外光谱和12.2 ppm核磁信号变化及质谱结果提示CTC的成功合成,引入二甲双胍构建CTC-Met无载体纳米药物,电镜下为100 nm球形,带有+(35±5)mV;相较游离姜黄素,CTC-Met纳米药物无溶血风险(P＜0.01),且能高效地以浓度依赖方式清除ABTS和DPPH自由基(P＜0.01),二甲双胍的引入使CTC-Met无载体纳米药物有更高的血脑屏障(BBB)穿透效率(P＜0.01)和神经元靶向性.在MCAO小鼠实验中,相比姜黄素和二甲双胍单体药物,CTC-Met纳米药物显著降低脑梗死体积(P＜0.01)、减轻小鼠神经功能障碍(P＜0.01),且改善皮质神经元形态(P＜0.01);在OGD/R细胞实验中,我们发现CTC-Met纳米药物能够逆转AIS诱导的神经元铁死亡(P＜0.01)、增强脂质过氧化功能(P＜0.01).结论 构建的无载体CTC-Met纳米药物能安全、高效地清除自由基,有效靶向神经元,按需释放药物以逆转AIS诱导的神经元铁死亡.二甲双胍的引入对姜黄素的神经保护作用起到"减压增效"的效果.