SOX4在下咽癌中的表达及其对癌细胞恶性生物学行为的影响

目的:分析下咽鳞状细胞癌(hypopharyngeal squamous cell carcinomas,HSCC)组织中SRY相关HMG-box转录因子 4(SRY-box transcription factor-4,SOX4)的表达及其与患者临床病理特征及预后的关系.观察siRNAs敲低FaDu人咽鳞癌细胞中SOX4 表达对细胞增殖、迁移及裸鼠成瘤的影响.方法:(1)选取下咽癌石蜡切片标本 76例,癌旁正常组织标本 18 例作为对照,采用免疫组化检测SOX4 和Ki67 的表达水平.(2)选取 6 对新鲜的下咽癌组织和相邻正常组织,采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测SOX4 表达水平.(3)运用siRNAs敲低FaDu细胞中SOX4 表达.(4)饥饿释放实验检测SOX4 在增殖期FaDu细胞中的表达水平,CCK-8 法检测FaDu细胞增殖活性,流式细胞术检测细胞周期的分布,Transwell试验和划痕实验检测细胞迁移能力.(5)Western blot检测上皮间充质转化(epithelial mesendyinal transition,EMT)相关分子的表达.(6)裸鼠成瘤实验观察SOX4 对肿瘤生长的影响.结果:(1)与癌旁正常组织相比,HSCC组织中SOX4 表达明显升高,与肿瘤分化程度、肿瘤大小、临床分期、淋巴结转移及Ki67 表达相关(P<0.05).(2)SOX4 高表达患者生存期较短.(3)增殖期FaDu细胞SOX4 和PCNA的表达同步明显增加.(4)SOX4-Si2 处理后FaDu细胞中SOX4 染色强度显著降低,细胞增殖能力明显下降,细胞停滞于G1 期,S期细胞减少.(5)SOX4-Si2 干扰后FaDu细胞划痕愈合能力明显下降,细胞迁移数减少,上皮表型标志物β-连环蛋白和E-钙粘蛋白表达显著增加,而间质表型标志物波形蛋白和N-钙粘蛋白表达显著降低.(6)裸鼠成瘤实验显示,SOX4-Si2 干扰后裸鼠肿瘤生长受到显著抑制,Ki-67 阳性率增高.结论:SOX4 在HSCC中过表达,SOX4 在体内外对下咽癌的进展和迁移起着重要作用,可作为下咽癌患者诊断和治疗的分子靶标.