小檗碱激活SIRT1/AMPK信号通路改善高糖诱导的系膜细胞异常增殖和自噬功能

目的 研究小檗碱(BBR)对高糖(HG)环境下的系膜细胞增殖和自噬水平的影响及具体的分子机制.方法 将指数生长期的系膜细胞分成以下几组:正常组、高糖组、高糖+小檗碱治疗组(30、60、90 μmol/L)、高糖+小檗碱(90 μmol/L)+腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)抑制剂组(CC组);高内涵细胞成像仪计算系膜细胞的数量;免疫荧光法检测Ⅳ型胶原蛋白(Col-Ⅳ)、纤连蛋白(FN)、微管相关蛋白 1轻链3 B(LC3B)在系膜细胞中表达情况;Western blot法检测细胞上LC3B、Beclin-1、p62、Col-Ⅳ、FN和沉默信息调节因子1(SIRT1)/腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)信号通路蛋白表达水平.结果 与正常组比较,高内涵细胞成像仪结果显示高糖组系膜细胞异常增殖;免疫荧光法和Western blot法结果显示高糖组系膜细胞外基质沉积蛋白Col-Ⅳ、FN的表达水平升高;Western blot 法结果显示高糖组系膜细胞中SIRT1、p-AMPK、LC3B、Beclin-1 蛋白表达降低,p-p65、p62 蛋白表达升高.与高糖组比较,BBR对高糖诱导的系膜细胞异常增殖能力具有抑制作用;BBR能降低系膜细胞外基质沉积蛋白 Col-Ⅳ、FN 的表达水平;BBR 能升高系膜细胞上SIRT1、p-AMPK、LC3B、Beclin-1 蛋白的表达,同时降低 p-p65、p62 蛋白的表达;CC组减弱了大剂量BBR抑制系膜细胞增殖和促进自噬的作用.结论 小檗碱能有效抑制高糖诱导的系膜细胞增殖和提高细胞自噬水平,这可能与SIRT1/AMPK信号通路有关.