肠炎沙门菌运动缺陷突变株的筛选及其突变基因鉴定
China Poultry（2022）
摘要
为挖掘介导肠炎沙门菌运动能力的功能基因,深入研究沙门菌运动及致病机制,采用转座子突变技术构建肠炎沙门菌C50041突变库,筛选获得运动性弱或无的突变株;在突变株运动缺陷表型确认后,提取细菌基因组DNA,PCR扩增转座子在细菌基因组中所插入的侧翼序列,并对侧翼序列进行基因测序进行Blast比对相似度,确定突变失活的基因.结果显示:从Tn5转座子突变库中筛选了 10000多株突变株,从中筛选出10株运动性缺陷的突变株,并成功PCR扩增每个突变株转座子侧翼序列,通过Blast比对初步确定fliP、fliD、rfaL、rfbK、cpsG、csrD 6个基因的失能导致肠炎沙门菌运动缺陷,其中fliD、fliP和cpsG为鞭毛合成相关基因,rfbK和rfaL为脂多糖合成相关基因,csrD为调控基因.研究结果为进一步探讨沙门菌运动性及致病机制奠定了基础.
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